培養(yǎng)基過(guò)濾器適用于對(duì)配制的細(xì)胞、組織培養(yǎng)液進(jìn)行除菌過(guò)濾的器材。過(guò)濾器根據(jù)原理不同可以分為負(fù)壓真空式、正壓桶式、正壓平板式。不同種類(lèi)的濾器由于其結(jié)構(gòu)、原理的不同,故而適宜于針對(duì)不同使用場(chǎng)景、不同過(guò)濾量用戶(hù)。今天我們會(huì)議圣斯特Sciencetool品牌的一款FH-P5A瓶頂式負(fù)壓真空過(guò)濾器為例,來(lái)說(shuō)明該原理的濾器適用的范圍,以及具體使用方法。
FH-P5A主體結(jié)構(gòu)分為2個(gè)部分,黃色透明塑料濾杯和白色帶吸嘴的過(guò)濾基座。過(guò)濾基座下面帶有GL45的內(nèi)螺紋,可以直接擰在藍(lán)蓋玻璃試劑瓶上?;纳习氩糠譃樾ㄊ浇Y(jié)構(gòu),帶有一片濾膜支撐片,過(guò)濾前可以將0.22微米濾膜平鋪在基座上,并將黃色濾杯放入旋轉(zhuǎn)卡緊。裝好后可以整體放入高溫高壓滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。滅菌結(jié)束后使用泵管插入白色基座側(cè)邊的連接嘴上。下面是過(guò)濾器的詳細(xì)特點(diǎn):
1.過(guò)濾器采用PES聚醚砜材質(zhì)制作,整體均可以進(jìn)行121度高溫高壓滅菌后反復(fù)使用。
2.可以搭配任意品牌的過(guò)濾膜使用,兼容直徑47和50mm濾膜,不限制濾膜的材質(zhì)和孔徑,可根據(jù)使用的實(shí)際需要來(lái)選擇。
3.濾器底部為GL45螺紋口,可以和任意品牌的藍(lán)蓋試劑瓶連接搭配使用,過(guò)濾結(jié)束后取下漏斗,蓋上試劑瓶蓋就可以保存濾液,避免二次污染的同時(shí)操作也十分簡(jiǎn)便。
4.濾杯容量為500ml,杯身帶有刻度線(xiàn),刻度線(xiàn)和濾杯采用模具一體注塑成型,不同于后期印刷的工藝,一體成型可以確保常年使用,刻度線(xiàn)始終如全新品一樣不會(huì)退變消失。
5.特別設(shè)計(jì)了一款自動(dòng)進(jìn)液蓋,過(guò)濾時(shí)蓋上杯蓋,將進(jìn)液管一頭接在濾杯蓋上,另一頭放入待過(guò)濾液體中,打開(kāi)抽濾泵后,就可以自動(dòng)將液體吸入濾杯內(nèi)并通過(guò)濾膜。自動(dòng)進(jìn)液省時(shí)省力,可以不需要手工倒液,過(guò)濾過(guò)程中也不需要人工照看。
6.濾杯和濾膜放置基座采用旋卡式設(shè)計(jì),只需要把濾杯放入濾膜基座輕輕旋轉(zhuǎn)就可以使兩部分連接緊密,不會(huì)漏液漏氣。該設(shè)計(jì)不需要使用夾具或卡箍來(lái)固定,單手即可操作換膜,更加便利、密封性更佳。
在了解了過(guò)濾器的特點(diǎn)后,下面是具體的操作和使用方法:
a.檢查組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座的濾膜墊片是否已安裝;若有若有掉落,請(qǐng)依<圖 3b>將過(guò)濾膜墊片放到過(guò)濾基座中,并用力下壓讓墊片可以卡住。
b.將組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座接到組織培養(yǎng)瓶的瓶口上,以順時(shí)針?lè)较驅(qū)⒔M織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座旋緊。
c.用鑷子將47 mm或50 mm的濾膜放到組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座濾膜墊片的上方,并保持在組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座的中間位置。
d.將過(guò)濾杯放置于濾膜的上方,再以順時(shí)針?lè)较蜉p輕的旋緊,讓過(guò)濾杯卡住過(guò)濾基座。
e.將要過(guò)濾的樣品倒入過(guò)濾杯中,過(guò)濾過(guò)程中如需要接觸的空氣是干凈無(wú)菌,請(qǐng)?jiān)诼┒飞w上插上0.2 µm的過(guò)濾器,并將漏斗蓋蓋到過(guò)濾杯上。
f.啟動(dòng)抽濾泵進(jìn)行過(guò)濾,等待過(guò)濾完成后將真空幫浦關(guān)閉,并轉(zhuǎn)動(dòng)真空泵上的調(diào)壓閥慢慢的將殘留的真空泄掉。
g.將過(guò)濾杯從組織培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)接過(guò)濾座上以反時(shí)針?lè)较蛐_(kāi),請(qǐng)依實(shí)驗(yàn)程序進(jìn)一步處理濾膜。
h.再依實(shí)驗(yàn)程序進(jìn)行收集,分析或處理瓶?jī)?nèi)的溶液。
i.完成過(guò)濾實(shí)驗(yàn)后,請(qǐng)將過(guò)濾漏斗的零組件,依照維護(hù)方法立刻進(jìn)行清潔處理。